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用了这么多年移液器,你用对了吗?
2020.09.08   点击76次

相信小伙伴们每天都在和移液器打交道,移液是实验室中最常见不过的操作。但不论是从事科学研究的学术实验室,还是测试实验室,数据的生成很大程度上受到移液器性能以及使用者操作技术的影响。

当移液数据出现问题时,我们总会怀疑移液器的性能,但是科学文献表明,移液技术对实验的成败也起到关键作用。忽视技术指导可能会造成时间上和金钱上的巨大损失。

Yamamoto 测试了来自 7 个动物检疫所的 33 名参与者进行移液器操作培训前后的误差对比。结果显示,简单的移液操作培训即可提高移液的准确性。

培训前后的箱线图分析

Fig. 2快三平台地址 SDs for ten samplings for each participant before and after training for pipetting technique. Boxes represent the first and third quartiles, and the bold horizontal line inside the box represents the median. Whiskers are for upper and lower boundaries of the 1.5 interquartile range (IQR), and outliers are shown as circles

那么,问题来了:良好的移液技术应该包括哪些方面?

快三平台地址接下来,我们就从使用最常见的移液器移液的 5 个步骤以及如何准确的实施这些步骤来说明。

最佳量程选择与量程设定

快三平台地址① 移液范围选择在满量程的 35% 到 100% 时,可以保证最佳的准确性和重复性。选择合适的量程可以提高 1% 移液精度!尽量避免将移液器量程设置为最大值的 10% 以下。

② 设定齿轮控制的移液器量程时,始终保持「下调」到所需量程,当由小量程调节到大量程时,旋转调节旋钮到达超过所需量程 1/3 圈处,然后回调到所需量程准确位置,这样能够减少机械回冲或者齿轮滑动带来的影响。

浸入的深度和角度

① 将吸头浸入合适的深度可以提高 5% 的准确性。吸头浸入太深会导致吸液偏多,相反,浸入太浅,会吸入空气。

快三平台地址各种型号规格的移液器推荐的吸头浸入深度如下所示:

移液器规格吸头浸入深度
2μL和10 μL1 mm
20μL和100 μL2-3 mm
200μL和1000 μL3-6 mm
5000 μL和10 mL6-10 mm

② 手持移液器的角度也会影响准确性。保证吸液或排液时偏离垂直不超过 20°,可以提高 2.5% 的准确性。

润洗

润洗是一种快速,简单的提升移液准确性高达 0.2% 的方法。 为什么呢?因为液体可能会在吸头内壁上残留形成液体薄膜,这样所得的错误值将小于理论值。想要获得更好的移液精度,可以在安装新吸头后, 用相同样品对吸头进行 2~3 次润洗,这样薄膜会保持相当的恒定,从而提高移液的准确性和重复性。

吸液

快三平台地址保证吸液的一致性可以提高 5% 的准确性。移取不同样品时,使用一致的移液节奏,按压或释放按钮的速度平稳一致,到达第一停止点的用力应保持一致。快速或不平稳的吸液会使液体喷溅、产生气雾、套柄污染以及样品量损失。

分液

良好的分液技巧也能提高 1% 的准确性。分液时用吸头接触容器壁时可以获得更好的一致性。将吸头的孔口端沿着容器壁向上滑动可以去除孔口端残留的液体。另外两种技巧同样非常适用于水溶(非粘性)液。

本文来自:梅特勒
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